Методы определения группы крови

Методы определения группы крови

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность.

Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

  • I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов;
  • II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β;
  • III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά;
  • IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Определение групп крови

Методы определения

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Разведение производится так:

  1. В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
  2. Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.

Непосредственно исследование проводится таким образом:

  1. На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
  2. Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Правила расшифровки результатов

Видео: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

  • Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы;
  • Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй;
  • При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III;
  • Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками   Наличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитами  Группы крови
0(I) A(II) B(III) AB(IV) 0(I) A(II) B(III)
+ + 0(I)
+ + + A(II)
+ + + B(III)
+ + + AB(IV)

+ агглютинация;

– агглютинация отсутствует;

— реакцию не проводят.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.

Цоликлоны

 Вид цоликлонов Группа крови
Результат агглютинации Анти-А Анти-В
0(I)
+ A(II)
+ B(III)
+ + AB(IV)

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

  • Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0;
  • Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования;
  • Стеклянные палочки для перемешивания образцов;
  • Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

Видео: Определения групп крови с помощью цоликлонов

Источник: https://moyakrov.info/blood/opredelenie-gruppy-krovi

Определение группы крови: цоликлоны, стандартные сыворотки и перекрестный способ

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А;

цоликлон анти-В;

цоликлон анти-D;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

 Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

AB (IV)

Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)

AB (IV)Rh-

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки
  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин.

При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV).

Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.

  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.

  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными.

Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при  реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают.

Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Источник: http://anest-rean.ru/gruppa-krovi/opredelenie/

Как определить группу крови — популярные методы

Наверняка каждый хотя бы раз в жизни сталкивался с анализом на определение группы крови. О том какие существуют способы определения группы крови и каким из них лучше всего проводить тест на принадлежность к тому или иному виду – тема сегодняшней статьи.

Зачем проводят исследование на группу крови?

В современной гематологии, под группой крови понимают специфический набор антигенов, расположенных на поверхности эритроцитов, определяющий их специфичность. Данных антигенов существует огромное количество (обычно, используется таблица групп со всевозможными антигенами), однако, во всем мире признана классификация крови по системе АВ0 и резус-фактору.

Читайте также:  Почему понижены лимфоциты в крови

Группа крови обязательно определяется при подготовке к любым операциям. В число обязательных контингентов, в которых проводится определение группы крови, входят военные, работники силовых структур и внутренних органов.

Данное мероприятие необходимо, так как в случае развития ургентного состояния (угрожающего жизни) может возникнуть необходимость в переливании, когда не будет времени проводить анализ и тест на ее совместимость с донорской.

Определение групп крови стандартными методами

Существует множество различных техник, но в клинических лабораториях чаще всего используют методику стандартных сывороток. Как определить группу крови по стандартным сывороткам?

Этот метод применяется для определения антигенов системы АВ0. Стандартная изогемагглютинирующая сыворотка имеет в своем составе набор специфических антител к поверхностным молекулам эритроцитов.

При наличии антигена, на которое распространяется действие антител, происходит образования комплекса антиген-антитело, что провоцирует запуск каскада иммунных реакций.

Ее результат — агглютинация эритроцитов, на основании характера агглютинации судят можно сделать заключение об отнесении образца к той или иной группе крови.

Разведение проводится следующим образом – в пробирку с 1 мл 0.9 процентного раствора пищевой соли добавляют 1 мл плазмы и тщательно перемешивают раствор.

После, пипеткой отбирают 1 мл полученного раствора плазмы и добавляют его во вторую пробирку, содержащую изотонический раствор. Таким образом, достигается разведение плазмы в соотношении 1:256.

Использование других разведений может привести к появлению диагностической ошибки.

Техника проведения исследования следующая – на специальный планшет для определения группы крови помещают по одной капле (общим объемом около 0.

1 мл) каждой сыворотки в область с соответствующей пометкой (используются сыворотки двух образцов, среди которых один является контрольным, а второй используется для исследования).

После этого, возле каждой капли сыворотки помещают исследуемый образец (0.01 мл), после чего он по отдельности смешивается с каждым видом диагностикума.

Через некоторое время (в среднем, около 5 минут) проводят анализ полученных результатов с описанием характера произошедшей реакции:

  • если в исследуемом образце происходит агглютинация – тест положительный;
  • если агглютинации нет, то реакция отрицательна.

Проще говоря, наличие агглютинации говорит о том, что в крови имеется необходимый набор агглютиногенов, и если она произошла, значит кровь принадлежит к той группе, антитела к которой содержатся в сыворотке. На основании полученных результатов строится таблица или схема, которая визуально отображает результаты.

Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток

Метод перекрестной реакции

Данная техника заключается в определении агглютиногенов с помощью цоликлонов или стандартных сывороток с параллельным выявлением агглютининов при помощи эталонных эритроцитов.

Методика проведения практически не отличается от определения группы крови при помощи сывороток, однако, есть некоторые дополнения.

На планшетку ниже нанесенных сывороток добавляют по одной малой капле стандартных эритроцитов. После этого, из пробирки, содержащей прошедшую через центрифугу кровь пациента, извлекают с помощью пипетки плазму, которую добавляют к стандартным эритроцитам, а находящиеся на дне ее эритроциты вносят в стандартную сыворотку.

Также как и при методике стандартных сывороток, полученные результаты оценивают через несколько минут после начала реакции. При наличии агглютинации в стандартных сыворотках судят о наличии агглютининов системы АВ0, а при развитии реакции плазмы со стандартными эритроцитами – об имеющихся агглютиногенах.

Результаты исследования с применением сывороток и стандартных эритроцитов

Перекрестный метод получил широкое распространение благодаря тому, что он предотвращает основные диагностические ошибки при определении крови стандартными методиками.

Определение группы цоликлонами

К использованию цоликлонов прибегают при невозможности определения антигенов системы АВ0 при помощи стандартных сывороток.

Алгоритм использования моноклональных антител следующий: на планшетку наносится по одной крупной капле раствора цоликлонов (обязательно следует пометить, где и какие цоликлоны находятся). После этого, к сыворотке добавляют по одной капле исследуемой крови и оценивают полученные результаты через несколько минут.

Флаконы с различными цоликлонами

Тест должен проводиться в специально созданных условиях с соблюдением температурного режима и влажности (перед тем, как провести данный анализ, необходимо убедиться в пригодности цоликлонов).

Тест считается положительным, если в исследуемом образце произошла агглютинация эритроцитов (т.е. прошла реакция между антителом и антигеном).

Если положительный результат наблюдается в двух каплях, судят о принадлежности образца к IV группе. Если же наоборот, реакции не произошло ни в одном образце, то группа крови предположительно I.

Ошибки при определении крови данной методикой встречаются редко.

Экспресс-методика “Эритротест”

Несмотря на то, что общепринятые методики определения групповой принадлежности крови повсеместно распространены, в настоящее время широко внедряются в медицинскую и лабораторную практику экспресс-методы определения группы крови. Одним из них является “Эритротест”.

Комплект для определения группы крови “Эритротест-группокарт” состоит из следующих компонентов:

  • универсальная планшетка с пятью лунками для проведения определения группы по системе АВ0 и ее резус-принадлежности;
  • скарификатор для получения образца для исследования;
  • чистая пипетка с помощью которой проводят набор растворов;
  • стеклянные палочки, использующиеся для перемешивания образцов.

Все перечисленное оснащение необходимо для правильного проведения экспресс диагностики.

Процесс проведения анализа с использованием методики «Эритротест»

В лунках планшетки находятся цоликлоны к поверхностным антигенам (цоликлоны анти-А, анти-В, анти-АВ), а также к основному антигену, обуславливающему наследование резус-фактора (цоликлон анти-D). В пятой лунке находится контрольный реагент, позволяющий предотвратить ошибки и правильно провести анализ на групповую принадлежность.

Для оценки полученных результатов используется специальная таблица, в которой перечислены всевозможные результаты исследования.

Источник: https://redkrov.ru/group/kak-opredelit-gruppu-krovi.html

Определение группы крови у взрослых и детей: методы :

«Люди голубой крови», «королевская кровь», «кровный брат» – существует много выражений, которые затрагивают одну из важнейших систем в организме человека. Она отвечает за тканевое питание, дыхание, обмен веществ, всасывание и усваивание питательных веществ. Роль кровеносной системы сложно переоценить.

Здесь нет мелочей. Так, групповая принадлежность и резус-фактор играют большую роль в жизни человека. Особенно это важно для женщины. Определение группы, биохимический и другие анализы предваряют любое вмешательство в организм пациента.

Лечение практически каждого заболевания начинается с взятия биологического материала для исследования.

Интересные факты о группе крови

В Японии считают, что характер человека полностью зависит от того, какая у него групповая принадлежность крови. У обладателей первой группы преобладают такие качества, как самоуверенность и решительность.

Люди со второй группой крови надежны, но замкнуты в себе. Те, кто обладают третьей, чаще всего честолюбивы и умны. У требовательных, уравновешенных людей течет в жилах кровь четвертой группы.

По этому принципу многие создают семьи, заводят друзей, работодатели подыскивают себе сотрудников.

На Австралийском континенте живет удивительный человек Джеймс Харрисон. За свои 74 года он успел сдать кровь около 1000 раз! Медики утверждают, что как минимум 2 млн новорожденных детишек сумел спасти этот необычный донор. Он обладает не только самой редкой группой, но и может похвастаться наличием особых антител, которые помогают младенцам с тяжелой анемией успешно бороться с недугом.

Система АВО

В мире существует 4 группы крови, имеющих свои особенности. Первая группа не содержит белков антигенов А и В, поэтому она является универсальной в качестве донорской. Но человеку, имеющую такую группу крови, нельзя переливать никакую другую, кроме первой. Вторая группа носит антигены А.

Она совместима с первой и второй. Третья группа крови имеет в своем составе антигены В. И к ней идеально подходит первая или третья. Четвертая группа содержит антигены А и В, и она совместима с кровью любой группы.

В настоящее время врачи стараются осуществлять переливание реципиенту той же группы, что и его собственная.

Это общепринятая система, в которой работают все медицинские учреждения мира. Определение группы крови и резус-фактора проводят всем новорожденным детям, людям перед любым оперативным вмешательством, переливанием крови и ее компонентов. Особенно за этими показателями у женщин во время беременности наблюдают акушеры-гинекологи.

Методы определения группы крови

Существует несколько способов определения групповой принадлежности крови человека в лабораторных и даже домашних условиях:

  1. По стандартным сывороткам.
  2. По стандартным эритроцитам.
  3. С применением цоликлонов.
  4. По группе крови родителей.

Важно отметить, что определение группы крови и резус-фактора последним способом не является достоверным. Этот метод можно назвать «домашним». Он подходит в качестве развлечения подросшим детишкам, для лучшего понимания того, как же происходит наследование подобных признаков ребенком.

Как определить группу крови, используя цоликлоны

Применение цоликлонов – это простой и современный способ определения группы крови человека и ее резус-фактора. Препарат получают из биологического материала мышей и повсеместно используют в системе АВО.

Плюсы цоликлонов в том, что они быстрее агглютинируются, то есть сворачиваются, с кровью и реакция становится более выраженной. Чаще всего лаборанты используют реагенты анти-А и анти-В, однако в некоторых случаях работают и с анти-АВ и анти-О.

Определение группы крови с помощью цоликлонов требует меньше времени и подготовки.

На специальном планшете делают две надписи соответственно названиям используемых цоликлонов. Под ними наносят небольшую каплю исследуемой крови, рядом – немного реагента. Стеклянной или любой другой чистой палочкой перемешивают обе жидкости, затем в течение двух минут медленно покачивают планшет для лучшего соединения и сворачивания белков. По реакции агглютинации судят о результатах.

Полное отсутствие склеивания говорит о том, что исследуемая кровь принадлежит к первой группе. Склеивание с цоликлоном анти-А доказывает, что она относится к второй группе. Если наблюдается реакция с реагентом анти-В, значит, у пациента кровь третьей группы. При агглютинации с обоими цоликлонами ясно, что исследуемый материал содержит антигены А и В.

Следовательно, является кровью четвертой группы.

Определение группы крови и резус-фактора с помощью цоликлонов является наиболее удобным и распространенным в настоящее время.

Для того чтобы узнать резусную принадлежность, нужно на планшет нанести несколько капель цоликлона анти-D-супер и одну – исследуемой биологической жидкости. Далее нужно их смешать.

Наличие реакции свертывания говорит о том, что пациент имеет положительный резус-фактор. Соответственно, отсутствие агглютинации означает то, что резус отрицательный.

Определение группы крови стандартными сыворотками

В этом случае используют стандартные сыворотки четырех известных групп. Каждого реагента берут по две серии, чтобы обеспечить наиболее точный результат. Для облегчения работы сыворотки окрашены каждая в свой цвет: О(I) – бесцветная, А(II) – синяя, В(III) – красная, АВ(IV) – желтая.

На специальный планшет наносят сыворотки первых трех групп по две серии каждой. Рядом капают по одной капле исследуемой крови, взятой из пальца. Планшет аккуратно покачивают до полного перемешивания и по реакции агглютинации судят о результатах.

Определение группы крови – это всегда скрупулезная манипуляция, которая требует внимательности и сосредоточения.

Стандартные эритроциты для определения группы крови

Определение группы крови стандартными эритроцитами – это еще один высокоточный метод выявления групповой принадлежности. Его проводят с использованием стандартных эритроцитов, полученных из материала донора.

Читайте также:  Железодефицитная анемия у взрослых и детей

Сыворотку центрифугированной крови наносят на планшет в два ряда по три капли в каждом. Возле каждой из них помещают немного эритроцитарной массы в следующем порядке: О(I), А(II), В(III) – по две серии.

Так же как и при определении группы другими методами, в этом случае тщательно перемешивают капли крови и реагенты и судят о результатах по свертыванию белка.

Определение групповой принадлежности ребенка по крови родителей

Определение группы крови по родителям – это, пожалуй, единственный «домашний» метод. Согласно закону наследования ребенок берет от отца и матери по одному антигену. В таблице ниже представлены все возможные варианты наследования ребенком группы крови.

I (ОО) II(ОА) III(ОВ) IV(АВ)
I(ОО) Только I Или I, или II Или I, или III Или II, или III
II(ОА) Или I, или II Или I, или II Любая с равной долей вероятности Или II, или III, или IV
III(ОВ) Или I, или III Любая с равной долей вероятности Или I, или III Или II, или III, или IV
IV(АВ) Или II, или III Или II, или III, или IV Или II, или III, или IV Или II, или III, или IV

Определение группы крови ребенка по таблице может дать представление о наследовании генов и позволит с пользой провести время. Этот способ не является точным. Но он достаточно информативен. Разумеется, определение группы крови по родителям – это не самый лучший метод, для достоверного результата стоит обратиться в клинику.

Забор крови

Для определения групповой принадлежности берут материал из пальца и из вены. Для анализа используют как цельную кровь, так и сыворотку, которую получают в результате центрифугирования пробирки с биологическим материалом. Детям при рождении определение группы крови и резус-фактора проводят, применяя материал, взятый из пяточки.

Анализ берут в амбулатории или стационаре в условиях полной асептики и с использованием средств антисептики. Манипуляцию может делать только человек с медицинским образованием, а проведением реакции должен заниматься лаборант.

Анализ проводят несколько раз разные медработники, чтобы исключить влияние человеческого фактора на результат исследования.

Существуют приборы, которые способны точно и достоверно определить группу крови и резус-фактор, но даже после использования техники всегда проводится перепроверка, ведь здесь нельзя ошибаться.

Подготовка к сдаче крови на анализ

Группа крови и резус-фактор не меняются в течение всей жизни и не зависят от приема пищи, состояния здоровья, внешних факторов. Поэтому перед сдачей анализа не требуется специфической подготовки. Однако, чтобы снизить риск ухудшения качества исследования, важно сдавать материал натощак, а ужин должен быть легким и обязательно не позже 18.00.

Группа крови на рукаве

В жизни происходят разные ситуации, никто не застрахован от травм или несчастных случаев. Каждому человеку нужно знать свою группу крови, ведь при наступлении чрезвычайных обстоятельств эта информация может спасти жизнь в прямом смысле слова. Не зря в паспорт медработники ставят всем желающим соответствующую печать. Берегите здоровье свое и своих родных людей!

Источник: https://www.syl.ru/article/160079/new_opredelenie-gruppyi-krovi-u-vzroslyih-i-detey-metodyi

Способы определения группы крови

Групповую принадлежность крови по системе АВО определяют с помощью реакции агглютинации. Используют три способа определения групп крови по системе АВО:

• с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток;

• с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов (перекрёстный способ);

• с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А и анти-В).

При необходимости определения группы крови в экстренном порядке (при кровотечении необходимо срочное переливание крови) врач стационара определяет группу крови сам (в лаборатории перепроверку выполняют, но постфактум).

1. Определение групп крови с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток

Суть метода в обнаружении в исследуемой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для этого используют реакцию агглютинации. Постановку реакции проводят в помещении с хорошим освещением при температуре 15—25С.

Методика проведения реакции

1. Перед началом реакции подписывают тарелку (наносят фамилию и инициалы исследуемого), после чего на неё под соответствующие обозначения наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I, II и III групп в объёме 0,1 мл (капля около 1 см в диаметре).

Во избежание ошибок наносят две серии сывороток каждой из групп, так как одна из серий может иметь низкую активность и не дать чёткой агглютинации.

Всего получается шесть капель, образующих два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: 0(1), А(11), B(III).

2. Кровь для исследования берут из пальца или из вены.

Шесть капель исследуемой крови величиной приблизительно с булавочную головку (0,01 мл, маленькая капля) последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину в шесть точек, каждую — рядом с каплей стандартной сыворотки (количество исследуемой крови должно быть приблизительно в 10 раз меньше количества стандартной сыворотки, с которой её смешивают), потом их осторожно с помощью стеклянных палочек с закруглёнными краями перемешивают.

3. После смешивания тарелку периодически покачивают.

Агглютинация начинается в течение первых 10—30 с, наблюдение следует обязательно вести до 5 мин ввиду возможности более поздней агглютинации, например с эритроцитами группы А2(2).

4. В те капли, где произошла агглютинация, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия, после чего оценивают результат реакции.

Трактовка результатов

Реакция агглютинации может быть положительной или отрицательной.

При положительной реакции обычно в течение первых 10— 30 с в смеси появляются видимые невооружённым взглядом мелкие красные зёрнышки (агглютинаты), состоящие из склеенных эритроцитов.

Мелкие зёрнышки постепенно сливаются в более крупные зёрна, а иногда в хлопья неправильной формы. При этом сыворотка частично или полностью обесцвечивается. Положительная реакция может быть пескообразной или лепестковой.

Определение резус-фактораАнтигенная система резус-фактора

В 1940 г К. Ландштейнер и А. Винер обнаружили в эритроцитах человека совершенно новый антиген, названный ими резус-фактором (Rh). Резус-фактор присутствует в крови 85% людей, а у 15% отсутствует.

Система антигенов резус представлена пятью основными антигенами: D, С, с, Е, е (ранее считали, что их шесть, но позже было доказано, что аллельного гена d не существует). С и с, а также Е и е — аллельные антигены. Каждая из хромосом несёт только три гена из пяти: D, С или с, Е или е.

Наиболее активен из всех антигенов Rh0 (D) — резус-фактор. В зависимости от его наличия или отсутствия кровь людей делят на резус-положительную (Rh+) и резус-отрицательную (Rh-).

Способы определения резус-фактора

Все методы определения резус-фактора делят на способы, применяемые в клинической практике, и лабораторные способы.

Способы определения Rho(D) в клинической практике

Методика проведения реакции. Исследование проводят в центрифужных пробирках объёмом не менее 10 мл.

На дно пробирки вносят одну каплю стандартного универсального реагента, представляющего собой антирезусную сыворотку группы AB(IV), разведённую 33% раствором декстрана затем в нее добавляют одну каплю исследуемой крови (или эритроцитов).

Круговым вращением пробирки содержимое размазывают по её внутренней поверхности таким образом, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию и делает её крупнолепестковой.

Агглютинация на стенках пробирки наступаетв течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса антиген-антитело и чёткой агглютинации наблюдать не менее 3 мин. Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2—3 мл физиологического раствора и перемешивают путём однодвукратного перевертывания пробирки (без взбалтывания!).

Трактовка результатов.

Наличие агглютинации (крупные хлопья на фоне просветлённой жидкости) указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови

Правило Оттенберга

подвергаются агглютинации только эритроциты переливаемой донорской крови, так как агглютинины вливаемой крови разводятся в сосудистом русле пациента, их титр становится низким и они не в состоянии агглютинировать эритроциты реципиента. По правилу Оттенберга, можно переливать кровь, эритроциты которой не могут быть агглютинированы сывороткой реципиента.

Правило Оттенберга применимо лишь при переливании до 0,5 л донорской крови (!).

Источник: https://megaobuchalka.ru/10/19270.html

Группы крови. Определение группы крови и резус-фактора

Многочисленными исследованиями было показано, что в крови могут находиться различные белки (агглютиногены и агглютинины), комбинацией (наличием или отсутствием) которых и образуются четыре группы крови.

Каждой группе дано условное обозначение: 0 (I), А (II), В (III), AB(IV).
Установлено, что переливать можно только одногруппную кровь.

В исключительных случаях, когда нет одногрупповой крови, а переливание жизненно необходимо, допустимо переливание иногруппной крови.

В этих условиях кровь 0 (I) группы можно перелить боль­ным с любой группой крови, а больным, имеющим кровь AB(IV) группы, можно перелить донорскую кровь любой группы.

Поэто­му, прежде чем начинать переливание крови, необходимо точно установить группу крови больного и группу пере­ливаемой крови.

 

 

Определение группы крови.

Для определения группы крови пользуются стандарт­ными сыворотками групп 0 (I), А (II), В (III), которые спе­циально готовят в лабораториях станций переливания крови.
На белой тарелке на расстоянии3—4 см слева на­право ставят цифры I, II, III, обозначающие стандартные сыворотки.

Каплю стандартной сыворотки 0(I) группы наносят пипеткой в сектор тарелки, обозначенный циф­рой I; потом второй пипеткой наносят каплю сыворотки А (II) группы под цифрой II; так же берут сыворотку В (III) группы и третьей пипеткой-наносят под цифрой III.

Затем обследуемому укалывают палец и стеклянной палочкой переносят вытекающую кровь в каплю сыворот­ки, находящейся на тарелке, и смешивают до равномер­ного окрашивания. В каждую сыворотку крови переносят новой палочкой.

Через 5 мин с момента окрашивания (по часам!) по изменению в смеси определяют группу крови.

В той сыворотке, где произойдет агглютинация (склеивание эритроцитов), появляются хорошо видимые красные зернышки и глыбки; в сыворотке, где агглюти­нации не произойдет, капля крови останется гомогенной, равномерно окрашенной в розовый цвет.

В зависимости от группы крови обследуемого агглютинация произойдет в определенных пробах. Если обследуемый имеет 0 (I) группу крови, то склеивания эритроцитов ни с одной сы­вороткой не произойдет.

Если обследуемый имеет А (II) группу крови, то агглютинации не будет только с сыво­роткой группы А (II), а если обследуемый имеет В (III) группу, то агглютинации не будет с сывороткой В (III).

Агглютинация наблюдается со всеми сыворотками, если исследуемая кровь будет AB(IV) группы.
 

Иногда даже при переливании одногруппной крови наблюдаются тяжелые реакции. Проведенные исследования позволили установить, что приблизительно у 15% людей в крови отсутствует особый белок, так назы­ваемый резус-фактор.

Если этим лицам провести повтор­ное переливание крови, содержащей этот фактор, то воз­никнет тяжелое осложнение, называемое резус-конфлик­том, и разовьется шок. Поэтому в настоящее время всем больным обязательно проводят определение резус-фак­тора, так как реципиенту с отрицательным резус-фактором можно переливать только резус-отрицательную кровь.

Ускоренный способ определения ре­зус-принадлежности. На стеклянную чашку Петри наносят 5 капель антирезус-сыворотки той же груп­пы, что и у реципиента. В сыворотку добавляют каплю крови обследуемого и тщательно перемешивают. Чашку Петри помещают на водяную баню при температуре 42— 45°С.

Читайте также:  Гемолитическая болезнь у новорожденного ребенка

Результаты реакции оценивают через 10 мин. Если наступила агглютинация крови, то у обследуемого кровь резус-положительная (Rh+); если агглютинации нет, то исследуемая кровь резус-отрицательная (Rh—).

Разработан ряд других способов определения резус-фактора, в частности с помощью универсального антирезусного реагента D.

Обязательно определение группы крови и резус-принадлежности всем больным, находящимся в стационаре. Результаты исследования должны быть зане­сены в паспорт больного.

Источник: https://www.medglav.com/perelivanie-krovi/gruppy-krovi.html

Все методы определения группы крови

Определение группы крови является обязательным параметром для допуска и подготовки к различного рода оперативным вмешательствам. Анализ крови на определение группы важен для возможной ситуации, когда появляется необходимость в переливании реципиенту донорской крови, что особенно важно для военных и служащих схожих сфер.

Методы определения групповой принадлежности

Среди методов определения группы крови выделяют стандартный, метод перекрёстной реакции, при помощи цоликлонов и эритротеста-группокарты.

Групповая принадлежность крови по методике определения группы АВ0 устанавливается на основании реакции агглютинации.

Стандартный

Наиболее популярный способ определения группы крови и Rh, в котором использованы стандартные сыворотки. В его процессе выявляются антигены системы АВ0. Сыворотки, используемые при этом способе, состоят из антител к частицам на эритроцитах. Если антиген присутствует, начинается агглютинация эритроцитов, что и приводит к результатам анализа.

Процесс анализа происходит путём проведения следующих манипуляций: в пробирку с раствором обычной соли примешивают плазму. Далее набирают в пипетку получившийся раствор и смешивают в другой пробирке с физиологическим раствором. Далее используется планшет, на котором заранее размещают сыворотки. Возле каждой сывороточной капли капают образец, впоследствии смешиваемый с диагностикумом.

В последнее время часто используется более современный способ с применением гелевой методики, в которой происходит коллаборация агглютинации и использования гелевой среды.

Для этого применяются специальные диагностические карточки с микропробирками, в которых и содержится нужный гель. Он может иметь нейтральную среду или содержать антитела и реагенты.

Далее микропробирки подвергаются центрифугированию, в процессе которого агглютинированные эритроциты оседают на поверхности колонки с гелем.

Остальные эритроциты выпадают на дно.

По прошествии времени выдержки (около 5-ти минут) анализируют результаты, которые могут быть следующими:

  • Если агглютинация не наступила со всеми стандартными сыворотками – кровь I группы;
  • Если агглютинация наступила только с сыворотками O(I) и B(III) — кровь II группы;
  • Если агглютинация наступила только с сыворотками O(I) и A(II) – кровь III группы;
  • Если агглютинация наступила со всеми тремя сыворотками — кровь предположительно IV группы, но велика вероятность панагглютинации. Поэтому анализ дополняют четвёртой сывороткой AВ0, если после этого агглютинация не происходит, кровь причисляют к IV группе.

Метод перекрёстной реакции

В данном способе определения группы крови используются как стандартные сыворотки, так и цоликлоны в смеси с эталонными эритроцитами. Её исполнение фактически идентично предыдущей технике, но с некоторыми поправками.

На планшетную поверхность для определения группы крови наносятся сыворотки, а после этого прибавляются эталонные эритроциты.

Далее на планшет наносится плазма пациента, к эталонным эритроцитам, а эритроциты, осевшие на дно – к сывороткам.

Выжидается время и анализируются результаты:

  1. При наступлении агглютинации в двух каплях – группа I;
  2. Если агглютинация не наступила ни в одной из капель – группа IV;
  3. Если реакция наступила в каком-либо эталонном эритроците, далее группа определяется по свёртываемости в капле (её наличию или отсутствию).

Способ с применением цоликлонов

Данный алгоритм определения группы крови проводится зачастую в том случае, когда стандартные сыворотки неприемлемы или при исследовании крови другими способами возникли ошибки.

Метод усложняется требованиями к его проведению.

Температура в лаборатории не должна превышать 25 градусов, освещение должно быть обильным и правильно расположенным.

Реагенты должны содержаться в закрытом состоянии, их высыхание уменьшает активность антител. Не используются мутные реагенты или реагенты с примесями. Для каждого реагента используется строго своя пипетка.

Также для анализа применяется тарелка со смачиваемой белой поверхностью.

На планшетную поверхность наносят массивные капли цоликлонов с пометками об их виде, далее к ним прибавляют по капле крови и анализируют полученные результаты спустя 3-5 минут.

Расшифровка результата следующая:

  • При отсутствии реакции агглютинации во всех полученных каплях, когда в наличии нет антигенов А и В — значение выставляется для I группы;
  • При наличии реакции только в одной капле (анти-А), когда в наличии антиген А, значение выставляется для II группы;
  • При появлении реакции только в одной капле (анти-В), когда присутствует антиген В, значение выставляется для III группы;
  • При наличии реакции в обеих каплях, когда в наличии оба антигена, значение выставляется для IV группы, итоги перепроверяются.

Препараты, которые используются для данного анализа на определение группы:

  1. Обычный анти-D-цоликлон, используется для непрямой реакции;
  2. Супер-анти-D-цоликлон, используется для прямой реакции;
  3. Анти-D-микс, совмещающий предыдущие два препарата, используется как для выявления группы, так и резус-фактора.

Посмотрите видео на эту тему

Эритротест-группокарт

Ещё одним способом определения группы крови является применение эритротестов.

Они менее распространены, но в последнее время стали широко внедряться в практику домашнего использования.

Такой комплект можно приобрести в специализированной аптеке и использовать в домашних условиях.

Обычно в комплект набора входит планшет со специальными углублениями для образцов, скарификатор (игла для прокола пальца), стерильная пипетка, в которую происходит забор материала, и набор палочек из стекла для перемешивания содержимого лунок.

Читайте так же:  Все про определение группы крови цоликлонами

С помощью подобного теста можно определить не только принадлежность к группе крови, но и узнать свой резус-фактор.

Алгоритм определения группы крови данным способом построен на использовании вышеуказанных цоликлонов, заранее нанесённых на дно каждой лунки и высушенных для удобства использования.

Подготовка набора для определения группы крови состоит в записывании данных исследуемого пациента, нанесении капель воды в каждую из лунок, чтобы привести реагенты в «рабочее» состояние.

Далее у пациента забирается кровь и наносится в лунки, перемешивается входящими в комплект палочками.

Предварительно кровь наносится на пустое место, не затрагивающее лунки, и уже оттуда разносится разными палочками в каждую лунку отдельно, чтобы избежать загрязнения реагентами и не допустить ошибок. Результаты сравниваются с содержащейся в тесте карточкой с возможными результатами спустя 3-5 минут. Далее можно записать результаты в карточку и сохранить её.

Помимо эритротеста для домашнего использования существуют и иные аппараты, помогающие в определении группы крови и резус-фактора, например, комплект для определения группы крови КГК 01, который также применим и для выявления совместимости крови донора с кровью реципиента.

В набор обычно входит планшет, шпатель и штатив для сывороток.

Плюсы и минусы методов

Если говорить о каждом конкретном методе проверки группы крови, то можно выявить следующее:

  • Плюс перекрёстного метода в его контрольной направленности, то есть он имеет особенность предотвращать главные ошибки при диагностировании группы крови другими стандартными способами;
  • Плюс способа с применением цоликлонов заключается в его возможности применения в случаях, когда стандартные сыворотки не могут быть применены. Минус же заключается в сложности проведения, соблюдении всех условий для оптимального проведения процедуры;
  • Эритротесты хороши тем, что доступны и для домашнего использования, но отрицательной их стороной считается неидеальная результативность, то есть итог может быть некорректным.

Перечисленные методики в общей характеристике в равной степени обладают теми или иными положительными и отрицательными сторонами.

Среди них можно выделить минусы:

  • Возможность ошибки – даже при проведении сложной и оправданной методики могут появляться ошибочные результаты.
  • Обязательное соблюдение правил – многие методики должны проводиться в специальных условиях, требующих тщательной подготовки и соблюдения определённых параметров помещения, его температуры и влажности. Реагенты должны корректно храниться, что тоже накладывает свои трудности на практику проведения исследования.

Среди плюсов выделяют:

  • Многие из данных методик точны, позволяют получить правильный результат с точностью до 100% (особенно это касается способа с применением цоликлонов).
  • Быстрота выполнения – для проведения анализа и ожидания времени воздействия реагентов на кровь не уходит много времени, обычно продолжительность реакции составляет не более 5-ти минут.
  • Возможность определения родства при анализе крови на принадлежность к группе.

Читайте так же:  Техника определения группы крови по системе AB0

Достоверность методик

В некоторых случаях при определении группы крови могут возникать ошибки, имеющие различный характер.

Технические ошибки:

  1. Неправильное расположение реагентов — может нарушить корректность проведения анализа, так как спутаются все результаты. Перед применением важно изучить планшет с реагентами на наличие ошибок или некачественности самих реагентов.
  2. Несоблюдение температурного режима – исследование проводится при температуре не выше 25 градусов и не ниже 15 градусов, так как в крови могут содержаться агглютинаты, склеивающие эритроциты при недостатке тепла, а при его избытке антитела А, В и АВ могут терять свою активность.
  3. Нарушение количественного соотношения исследуемого материала и реагентов — приводит к ошибкам в результатах. Если количество эритроцитов значительно выше числа реагентов, агглютинация может пройти практически незаметно; если количества эритроцитов недостаточно, реакция проявляется слишком медленно и приводит к некорректной расшифровке результата.
  4. Несоблюдение времени наблюдения — приводит к некорректной расшифровке. Реакция может появиться спустя 10-15 секунд, что может быть рассмотрено в качестве результата, но для точной результативности важно выждать не менее 5-ти минут, так как слабый антиген А характеризуется замедленной реакцией.
  5. Несоблюдение подвижности смеси – при этом эритроциты могут осесть и дать неправильный результат при оценивании. Планшетную поверхность нужно постоянно покачивать.

Функциональные и другие ошибки:

  1. При определении трудноопределимой группы крови могут появиться ошибки. Так как эритроциты А2 низкоагглютинативны, их определение может вызвать ряд сложностей и появление последующих ошибочных результатов.
  2. Неспецифическая агглютинация эритроцитов – данное отклонение может наблюдаться у пациентов, страдающих анемией или иными аутоиммунными заболеваниями, у младенцев с гемолитическими патологиями.
  3. Неспецифическую агглютинацию можно спутать со специфической, поэтому для проверки проводится проба с сывороткой АВ. Делается это для корректного подбора донора.
  4. Наличие кровяных химер – эритроцитов, которые отличаются по показаниям, но находятся в одном кровяном русле. Возникает при частом переливании крови, у близнецов и после пересадки костного мозга.
  5. При наличии определённых патологий (цирроз печени, сепсис, ожоги) может наблюдаться повышенная агглютинация, что спутывает результаты анализов. При лейкозе обратная ситуация – снижение агглютинабельности.

Роль агглютинации важна в медицине.

С помощью неё выявляется группа крови, патологии. Подобные анализы крови помогают сохранить многим людям жизнь, так как правильный подбор всех параметров крови — резус-фактора и группы — очень важен при переливаниях и проведении оперативных вмешательств.

Источник: http://1pokrovi.ru/krov/gruppa/opredelenie.html

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector